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编号:13516617
双氢青蒿素对肝癌细胞氨基酸代谢的影响及机制研究(2)
http://www.100md.com 2020年1月15日 《中国药房》 20202
     2.3 GC-MS法测定Huh7细胞和BEL-7402细胞中氨基酸代谢物含量

    2.3.1 色谱条件色谱柱:DB-5 MS毛细管柱(30 mx250 μm,0.25 μm);载气:氦气;线性速度:40 cm/s;恒流模式:1.19 mL/min;程序升温(起始温度70℃,保持3mrn后,以5℃/min的速度升至300℃,保持10 min);进样温度:280℃;进样量:1μL;分流比:10:1。2.3.2质谱条件EI离子源;界面温度:300℃;离子源温度:230℃;EI轰击电压:70 eV;周期:0.2 s;检测电压:0.92 kV;扫描范围:质荷比(m/z):33~600 Da;溶剂切割时间:5.5 min。采用全扫描模式,扫描的离子为各个衍生产物的特征离子。

    2.3.3 细胞样品预处理取“2.1”项下对数生长的Huh7细胞和BEL-7402细胞,计数后分别以2xl06个/皿接种于10 cm的平皿中,在37℃、5%C02、饱和湿度培养箱中培养24h。每种细胞均随机分为两组 ......
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