氨磷汀对免疫性血小板减少性紫癜动物模型小鼠的干预作用(2)
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参见附件。
1.3 豚鼠抗血小板抗血清的制备
参考文献的方法[6-7]，取健康BALB/C小鼠，摘眼球取血，静置半个小时，800 rmp/min离心10 min，取上层血清1500 rmp/min离心15 min，取上层血清900 rmp/min离心10 min，取上层血清3000 rmp/min离心10 min，弃去血清，得底部沉淀血小板，加入1%草酸氨1 mL，静置5 min，3000 rmp/min离心10 min，弃去上层液体，底部血小板用生理盐水洗涤3次，用生理盐水稀释到浓度为1～2×109/L，分别与弗氏完全佐剂和弗氏不完全佐剂按1∶1混合成弗氏完全佐剂血小板抗原混合物与不弗氏完全佐剂血小板抗原混合物，备用；取健康豚鼠8只，于第1周注射弗氏完全佐剂血小板抗原混合物于其四肢、腹股沟、背部、皮下，每处注射100μL，于第2、3、4周注射同剂量的不弗氏完全佐剂血小板抗原混合物。第4周末用20%乌拉坦2 mL腹腔注射麻醉豚鼠，心脏取血。1500 rmp/min离心10 min，取上层血清，余下全血继续3000 rmp/min离心10 min。合并2次所得血清，得豚鼠抗小鼠血小板血清APS，-20℃保存，备用。自制直径9 cm琼脂糖平板，用打孔器打成梅花形孔，中间孔滴加血小板悬液(500×109/L)，周围孔加1∶2、1∶4、1∶8、1∶16、1∶32、1∶64不同效价的豚鼠抗小鼠血小板血清。37℃温箱孵育24 h观察沉淀弧，检测抗血清效价。
1.4 模型的制备及分组给药[8-9]
取60只雌雄各半的健康BALB/C小鼠，随机分为5组，每组12只，分别为氨磷汀高剂量组、低剂量组、模型组、正常组和阳性对照组 ......
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